紫外可見分光光度計是常用的分析儀器，因使用廣泛且頻率較高，所以經(jīng)常會出現(xiàn)故障。了解紫外可見分光光度計的常見問題與處理方法有利于及時解決故障，以保證實驗順利進行。

　　01關(guān)于儀器的預(yù)熱問題

　　在一般分光光度計的使用說明書上，要求儀器預(yù)熱時間約20分鐘；若是帶微處理器的分光光度計，開機后儀器自動進入自檢 (初始化)狀態(tài)，約需1O分鐘左右。在分光光度計預(yù)熱這個環(huán)節(jié)上，很多使用者或多或少存在問題，如開機只預(yù)熱電路系統(tǒng) (不調(diào)節(jié)波長、打開吸收池暗箱蓋預(yù)熱等)或認為初始化過程就是預(yù)熱等等。

　　對帶微處理器有自檢功能的分光光度計，開機后儀器自檢 (初始化)結(jié)束后，在測定窗口上，設(shè)置所需波長值， 用一個吸收池裝上純凈水置于光路上，調(diào) “0000A”后，預(yù)熱儀器，當(dāng)儀器顯示讀數(shù)不再變化后即可進行測定。

　　對于紫外可見分光光度計，由于有雙光源 (鎢燈與氘燈)， 為了延長燈的使用壽命，開機自檢完成后可以關(guān)掉測定時不用的光源燈。

　　02關(guān)于波長準確度的檢查與校正

　　日常在使用分光光度計時，是否要經(jīng)常進行儀器波長準確度的檢查？答案是否定的。當(dāng)在日常測定中發(fā)現(xiàn)儀器測定靈敏度下降，這時才應(yīng)進行波長準確度的檢查，最簡易的檢查方法 (粗檢 )是：儀器開機后，調(diào)節(jié)波長為 580nm，在吸收池座的通光道中插入一張白色卡片紙，若能觀察到一長方形的黃色光斑，說明波長準確度屬正常范圍，否則就應(yīng)進行波 長校正。

　　當(dāng)儀器經(jīng)過長途搬運、受過機械振動或更換光源燈泡后， 必須進行波長準確度的檢查與校正。粗檢同上，其校正方法有：干涉濾光片或鐠釹濾光片校正法、利用氘燈的特征發(fā)射線校正法。具體步驟可參考儀器使用說明書。

　　03關(guān)于吸收池的使用問題

　　按照吸收池使用的基本順序分說如下：

　　(1)吸收池的潤洗

　　吸收池裝液前必須用待裝溶液潤洗2～3遍，潤洗前是否要用純水先潤洗一遍呢?這可看具體情況區(qū)別對待。

　　如果初次用干的吸收池裝待測液 (特別是有色溶液)時， 從維護保養(yǎng)吸收池的角度講，為減小其干玻面對顏色的吸附能力，便于用后吸收池的清洗，建議先用純水潤洗一遍，再用待裝溶液潤洗 2～3遍；若后再用此吸收池裝濃度相近或更高濃度的溶液 (如從小到大測定標準系列溶液的吸光度)時， 可直接用待裝溶液潤洗2～3遍即可。

　　標準曲線法定量時，如果是先測定標準系列溶液的吸光度，當(dāng)測到樣品溶液時，由于測定的樣品溶液濃度比最后一 個標準溶液的濃度低或不可知時，建議先用純水潤洗一遍， 再用待裝溶液潤洗 2～3遍。

　　(2)吸收池的裝液、擦拭與放置 吸收池潤洗完成后注入待測溶液至池高的 2/3~3/4處。

　　(3)吸收池成套性檢驗及處理 新吸收池或吸收池使用一段時間后都必須進行成套性檢驗。

　　04關(guān)于吸光度測定重復(fù)性的問題

　　分光光度計在測定過程中，發(fā)現(xiàn)同一個溶液在不同時問里其測定結(jié)果不同，即重復(fù)性不好，其原因是什么?排除測定錯誤因素外，可 能原因有：

　　(1)儀器預(yù)熱時間不夠或預(yù)熱方法不對所造成，應(yīng)延長預(yù)熱時間或采用正確的預(yù)熱方法。

　　(2)光電轉(zhuǎn)換器 (如光電管)因長時間使用其光電轉(zhuǎn)換 效率發(fā)生了變化導(dǎo)致。這時標準溶液與待測溶液的吸光度都 同樣變低，在相對定量時對結(jié)果影響很小。但是對這類儀器，一般建議連續(xù)使用時間不應(yīng)超過3h，若需長時間使用，最好間歇30min 。

　　05其他問題

　　(1)發(fā)現(xiàn)測定過程中的一些不良操作不利于儀器的維護、保養(yǎng)，使用者應(yīng)盡可能避免。如在儀器的上方進行操作(如倒溶液)；拿出來的吸收池 (或吸收池架)放在儀器的面 板上；同實驗室不同儀器的吸收池混用等。

　　(2)關(guān)于防塵、防潮問題

　　儀器一般都隨機附有一只塑料布罩，不使用時用其罩住整個儀器，這是很好的防塵手段。但發(fā)現(xiàn)很多實驗室里不用附來塑料布罩，而是自己用一塊普通布或做成布罩來覆蓋儀 器，防塵效果不如塑料布罩理想。另外，在塑料布罩只放入數(shù)袋防潮硅膠，也能更好起到延長防潮的功效。在防潮時，如果儀器設(shè)有防潮干燥筒的，應(yīng)經(jīng)常檢查，發(fā)現(xiàn)變色立即更 換新的或加以烘干再用。

　　長期停用的分光光度計，要定期開機除潮，如每隔一個月通電預(yù)熱半小時，以保持整機呈干燥狀態(tài)，并且維持電子元件的性能。